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研究 & 開発

Research & Development

培養関連製品

Optiferrin™

Optiferrin™は、イネ(Oriza satavia)で発現させ高純度に精製した、動物成分不含(Animal free)のヒトトランスフェリン(Recombinant Human Transferrin)です。トランスフェリンは、血漿中で1分子あたり2個の鉄イオンと結合し、生体内で鉄イオンの輸送を担っています。幹細胞、初代培養細胞、ハイブリドーマ、CHO細胞をはじめとする各種細胞株の培養にご利用いただけます。

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ヒト血漿由来トランスフェリンとの比較(2)

Optiferrin™を添加した培地で培養したハイブリドーマの抗体産生量は、ヒト血漿由来トランスフェリンを添加した培地と同等以上を持つことが示唆されました。

ヒト由来トランスフェリン、鉄キレート剤を添加した培地と比較

CD34+幹細胞(臍帯血単核細胞由来造血幹細胞)の培養で、Optiferrin™を添加した培地は、細胞増殖の促進効果を持つことが示唆されました。

CD34+ stem cells (HSC) isolated from human umbilical-cord mononuclear cells blood were expanded in culture for 6 days. In basal media and 1 g/L Cellastim S Recombinant Human Albumin, different iron sources and iron carriers were supplemented at a concentration of 50 mg/L. The relative effect of supplementation on proliferation compared to conditions without the inclusion of any iron carrier or other iron source can be observed. Cell count was normalized using Plasma Human Serum Albumin and Iron Chelate (Plasma HSA/Iron Chelate = Normalized to 100).

Optiferrin™添加によるトランスフェクション効率の改善(1)

Functional lentivirus titer is increased with excess transferrin. HEK-293T cells were transfected with 2nd generation lentivirus plasmids and total lentivirus vectors were harvested 48 hours later and titered by functional transduction assay with HT-1080 cells analyzed by flow cytometry. Error bars represent standard deviation. OptiPEAK HEK293t is abbreviated as OptiHEK, transferrin is abbreviated as Tf. Estimated Infectious Units (IFU)/ mL is the average functional titer from three individual experiments with two technical replicates each.

Optiferrin™添加によるトランスフェクション効率の改善(2)

Transfection efficiency of HEK-293T is improved with excess transferrin. HEK-293T cells were transfected with a GFP reporter plasmid and analyzed 48 hours later by flow cytometry. Error bars represent standard deviation, * and ** indicate statistical significance. OptiPEAK HEK293t is abbreviated as OptiHEK. Mean percent GFP positive cells was calculated from three individual experiments with two technical replicates each.

こんな種類の細胞の培養に使われています。

Stem Cell & Regenerative Medicine Cell Lines
• Mesenchymal
• Embryonic
• iPS
• Cardiac
• Liver
• Kidney
• Keratinocyte
• Fibroblast
• Red blood
• Neural
• Osteoblast
• T cells

Research and Production Cell Lines
• CHO
• Hybridoma
• Vero
• HEK293
• Rat crypt
• HT29
• MDCK
• Hamster kidney
• PER.C6

Optiferrin™ 濃度一覧(Initial screening)

Optifferin™の推奨される含有量は、細胞の種類によって異なります。
InVitriaでは、下記のとおり、一部の細胞でOptiferrin™の初期スクリーニングを推奨していますが、その他の培養添加物、細胞源、およびその他の環境条件によって異なります。

Cell Type Recommended Optiferrin™ Inclusion Level (mg/L)
ARPE-19 10 – 30
A549 10 – 30
CHO 50 – 200
Dermal Fibroblasts 100 – 200
Dendritic Cells 20 – 60
HEK 10 – 30
Hematopoietic Stem Cells 50 – 150
Hybridoma 10 – 20
Mesenchymal Stem Cells 100 – 200
Natural Killer Cells 20 – 60
Neural Stem Cells 50 – 150
T Lymphocytes 20 – 60
T Regulatory Cells 20 – 60
VERO 10 – 30

論文

J Inorg Biochem. 2012 Nov;116:37-44. doi: 10.1016/j.jinorgbio.2012.07.005. Epub 2012 Jul 11. Biochemical and structural characterization of recombinant human serum transferrin from rice (Oryza sativa L.).
Protein Expr Purif. 2010 Nov;74(1):69-79. doi: 10.1016/j.pep.2010.04.019. Epub 2010 May 4. Expression, purification, and characterization of recombinant human transferrin from rice (Oryza sativa L.).